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乳腺癌CAF中IL

【作者】 孙龙 李旭军

【关键词】 乳腺癌 成纤维细胞 白细胞介素

摘要】目的 探讨乳腺癌相关的成纤维细胞 (CAF) 中白细胞介素-6 (IL-6) 介导的上皮间质转化及其在肿瘤三苯氧胺耐受中的作用.方法 选择2015年6月-2017年7月宁波市第二医院收治的乳腺癌患者50例,设为乳腺癌组; 选择同期治疗的乳腺纤维瘤患者45例,设为乳腺纤维瘤组,收集乳腺癌、乳腺纤维瘤组织,采用流式细胞筛选技术完成上述不同标本成纤维细胞的筛选,并进行体外稳定生长、传代; 采用趋化因子芯片分析比较乳腺癌及其他成纤维细胞分泌趋化因子表达水平; 采用乳腺癌CAF细胞转染针对IL-6基因的siRNA载体质粒,分析IL-6分泌情况; 采用免疫荧光显微镜及Real-time PCR、Western blot检测EMT相关指标,在CAF下进行共同培养,Real-time PCR、Western blot检测PI3K/Akt/mTOR及IL-6/JAK/STAT3信号通路.结果 倒置显微镜下结果表明: 两种细胞经过CAF中IL-6介导后乳腺癌细胞连接相对疏松,多边形态消失,部分细胞变为梭形,并且存在伪足; 而在乳腺腺瘤中CAF中IL-6介导的细胞变化不明显; 乳腺癌CAF分泌细胞因子IL-6表达水平,高于乳腺腺瘤组织 (P<0.05); 乳腺癌CAF分泌细胞因子IL-6表达水平,均高于癌旁组织与对照组 (P<0.05); 细胞划痕试验结果表明: CAF处理后乳腺癌细胞迁移距离为 (18.54 ± 3.05) mm,CAFsiRNA 处理后乳腺癌细胞迁移距离为 (23.50 ± 3.28) mm, CAF、CAFsiRNA及IL-6联合处理后乳腺癌细胞迁移距离为 (29.30±4.07) mm; Transwell小室侵袭试验结果表明: CAF处理后乳腺癌细胞侵袭数量为 (43.45±3.60) 个、CAFsiRNA处理后乳腺癌细胞侵袭数量为 (68.95±4.50) 个、CAF、CAFsiRNA及IL-6联合处理后乳腺癌细胞侵袭数量为 (85.63±5.77) 个; Western blot检测结果表明: CAF、CAFsiRNA-IL-6及IL-6处理后PI3K/Akt/mTOR及IL-6/JAK/STAT3信号表达,高于单一CAF、CAFsiRNA-IL-6 (P<0.05).结论 乳腺癌CAF中IL-6介导的上皮间质转化能诱导EMT的发生,能刺进肿瘤的增殖和侵袭转移,在肿瘤三苯氧胺耐受中发挥了重要的作用.

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